プロのための糖度検査ガイド:方法と原則の技術的分析
はじめに精度の役割
基本原則測定基準
物理的性質
化学的および分光学的特性
一般的な物理的方法
屈折測定光の力
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製品カテゴリー
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標準的なBrixの範囲 (°Bx)
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主要糖類
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測定に関する注意事項
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フルーツジュース(アップル、オレンジなど)
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10 – 15
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フルクトース、グルコース、スクロース
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糖分だけでなく、総可溶性固形分(TSS)を表す。.
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ソフトドリンク
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9 – 14
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ショ糖、HFCS
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一貫性が高く、重要なQCパラメータである。.
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ワイン用ブドウ(収穫時)
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19 – 25
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グルコース、フルクトース
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潜在的なアルコール度数を予測するために重要。.
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ハニー
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70 – 88
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フルクトース、グルコース
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粘度が高いため、サンプルの取り扱いには注意が必要です。.
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ジャムとゼリー
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65 – 70
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ショ糖、果糖、ブドウ糖
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ゲル化特性と保存に不可欠。.
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比重測定密度の測定
高度な分析テクニック
高速液体クロマトグラフィー
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移動相は、正確に混合された溶媒で、システムを通してポンプで送られる。糖分析では、アセトニトリルと水を混合することが多い。.
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高圧ポンプは、システム内を流れる移動相の流れを一定に保ち、パルスを発生させません。これは再現性のある結果を得るために非常に重要です。.
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インジェクターは、フローを中断することなく、少量の正確なサンプルを移動相流に導入します。.
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カラムはシステムの心臓部である。固定相が詰まったチューブで、一般的には化学基が結合したシリカ粒子である。糖については、アミンベースのカラムが一般的である。サンプルがカラムを通過する際、様々な糖が様々な程度で固定相と相互作用し、分離を引き起こす。.
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カラムの端にある検出器が、カラムから出る成分を検知します。糖分析では、屈折率検出器(RID)が最も一般的です。移動相の屈折率を変化させる化合物に反応します。蒸発光散乱検出器(ELSD)もより高い感度で使用でき、溶媒の変化の影響を受けません。.
酵素法
比較テクニカル分析
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パラメータ
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デジタル屈折計
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比重計
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酵素アッセイ
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HPLC
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原則
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屈折率
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密度/浮力
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特異的酵素反応
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クロマトグラフィー分離
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対策
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全可溶性固形分(°Bx)
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比重 (°P, °Bé)
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特定の糖分(グルコースなど)
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個別の砂糖
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精度
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良好(例:±0.1°Bx)
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まあまあ(±1.0 °P)
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非常に高い
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エクセレント(ゴールド・スタンダード)
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精密
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高い
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低い
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高い
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非常に高い
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コスト(楽器)
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低~中
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非常に低い
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培地(分光光度計)
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非常に高い
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コスト(サンプルあたり)
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非常に低い
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非常に低い
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高い
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高い
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スピード
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非常に速い(1分未満)
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遅い(温度安定が必要)
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ミディアム(30~60分)
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スロー(1本30~90分)
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使いやすさ
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とても簡単
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まあまあ簡単
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ラボのスキルが必要
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熟練したオペレーターが必要
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最適
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現場での使用、工程管理、迅速なQC
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醸造、ワイン醸造(発酵)
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研究開発、特定の砂糖の主張
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研究開発、規制、複雑な混合物
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ベストプラクティスとトラブルシューティング
準備の黄金律
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均質化は不可欠です。果肉、沈殿物、その他の固形物を含むサンプル、例えば果物のピューレや未濾過のジュースなどは、均一な液体を作るために十分に混合する。高剪断ブレンダーが必要な場合もある。.
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脱気は炭酸サンプルにとって非常に重要です。溶解したCO2が光学的表面に気泡を形成し、液体の密度を大幅に低下させます。これは、屈折率測定と比重測定の両方で誤った低い測定値につながります。試料を2つのビーカーの間を往復させるか、短時間の超音波処理で効果的に脱気します。.
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温度平衡が達成されなければならない。すべての物理的測定技術は温度に敏感である。ATCを使用しない比重測定や屈折測定の場合、試料、装置、環境は安定した既知の温度でなければなりません。試料を実験台の上に20~30分置いておけば十分なことが多い。.
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ろ過が必要な場合もある。浮遊固形物、タンパク質、脂肪は光を散乱させ、屈折計や分光光度計の光学測定を妨害することがあります。シンプルなシリンジフィルター(0.45μmなど)にサンプルを通すことで、透明な濾液が得られ、この干渉を排除し、精度を向上させることができます。.
よくある問題と解決策
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問題
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考えられる原因
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影響を受ける方法
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解決策
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一貫性のない/漂う読み取り
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1.計器が校正されていない。. <br> 2.温度変動。. <br> 3.プリズム/湿度計が汚れている。.
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屈折計、比重計
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1.蒸留水または標準液で校正する。. <br> 2.試料/装置を安定させる。. <br> 3.毎回使用する前に、器具をよく洗浄してください。.
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数値が高すぎるように見える
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1.他の可溶性固体(酸、塩)の存在。. <br> 2.試料中の浮遊粒子。.
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屈折計、比重計
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1.補正係数を使用するか、HPLCのような特定のメソッドに切り替える。. <br> 2.測定前にサンプルをろ過する。.
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リーディングが低すぎるように見える
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1.試料が適切に混合されていない(糖が沈殿している)。. <br> 2.炭酸サンプル中の気泡。.
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すべての方法
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1.サンプルを十分にホモジナイズする。. <br> 2.試験前にサンプルを完全に脱気する。.
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HPLCでピークが出ない、または分離が悪い
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1.移動相が正しくない。. <br> 2.カラムの劣化。. <br> 3.検出器の問題。.
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HPLC
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1.新しい移動相を用意し、脱気する。. <br> 2.カラムを洗浄または交換する。. <br> 3.検出器のランプと設定を確認します。.
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結論データから決断へ
ブリックス測定用センサーと装置:レビュー - PMC https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC8951823/
ブリックス - Wikipedia https://en.wikipedia.org/wiki/Brix
食品・成分分析用HPLCによる糖プロファイル|メダリオン研究所 https://www.medallionlabs.com/tests/sugar-profile-by-hplc/
食品の栄養表示 - eCFR Title 21 CFR 101.9 https://www.ecfr.gov/current/title-21/chapter-I/subchapter-B/part-101/subpart-A/section-101.9
栄養成分表示における加糖|FDA https://www.fda.gov/food/nutrition-facts-label/added-sugars-nutrition-facts-label
栄養成分表示の見方と使い方|FDA https://www.fda.gov/food/nutrition-facts-label/how-understand-and-use-nutrition-facts-label
飼料および食品中の一般的な栄養成分の液体クロマトグラフィー分析 - PMC https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC6352167/
酵素アッセイ:グルコースオキシダーゼ|シグマアルドリッチ https://www.sigmaaldrich.com/US/en/technical-documents/protocol/protein-biology/enzyme-activity-assays/enzymatic-assay-of-glucose-oxidase
ペルオキシダーゼ結合グルコース法 - StatPearls - NCBI Bookshelf https://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK594277/
グルコース酸化酵素 - Wikipedia https://en.wikipedia.org/wiki/Glucose_oxidase








